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武汉泰晟生物科技有限公司

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关于同时检测五种不同玛咖酰胺含量方法的探讨

关于同时检测五种不同玛咖酰胺含量方法的探讨

分类:
公司新闻
发布时间:
2018/10/27
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  玛咖主要产于云南迪庆、丽江等高原地区, 是一种非常独特的高原农作物, 具有增强体力、内分泌调节、抗氧化、抗衰老的功能, 是近些年来发现并广泛应用的营养保健产品。玛咖中含有大量有价值成分, 包括蛋白质、维生素、氨基酸、玛咖烯及玛咖酰胺等, 其中玛咖酰胺是最为主要的功能成分, 其含量的高低是决定玛咖价值的关键因素, 如何将玛咖酰胺从玛咖中分离出来、选择何种安全且高效的分离方法是当前生产研究面临的重大难题。
 
  1 高效液相色谱法分离玛咖酰胺实验过程
  1.1 实验仪器与试剂
  仪器主要有岛津LC-20A高效液相色谱仪-配置紫外检测器、RE 2000A旋转蒸发器、FRQ-1004DHT型超声清洗器、TDL-40C型低速台式大容量离心机等。
  试剂主要有间甲氧基-苄基-亚麻酰胺、苄基-亚麻酰胺、间甲氧基-苄基-亚油酰胺、苄基-亚油酰胺、苄基-十六烷酰胺5种玛咖酰胺对照品 (纯度98%以上) , 乙腈 (色谱纯) , 甲酸 (色谱纯, 美国天地有限公司) , 石油醚 (分析纯, 沸程60~90℃) 。
 
  1.2 液相色谱条件
  Waters XTerra C18 (规格为250mm×4.6mm, 5μm) 色谱柱, 保持柱温30℃, 乙腈:0.2%甲酸水90:10, 等度洗脱, 流动相流速1.0 m L/min, 紫外检测波长210nm, 单次进样量10μL。
 
  1.3 液相质谱联用条件
  选择电喷雾离子源ESI, 采用正负离子进行扫描, 将毛细管电压维持在4500V, 选择氮气为干燥气体流量为15L/min, 去溶剂温度为250℃, 维持0.7MPa的喷雾器压力, 进行多反应监测。
 
  1.4 对照品溶液的制备
  利用分析天平称取适量的5种玛咖酰胺对照品将其置于250m L的容量瓶中, 选择配比好的乙腈溶液溶解后定容, 然后从每份制备好的对照品分别取1.0m L、0.8m L、0.6m L、0.4m L、0.2m L及0.1m L的溶液, 置于10m L容量瓶中, 选用乙腈溶液进行定容, 摇匀后共得到30种不同浓度、不同种类的玛咖酰胺对照品溶液。
 
  1.5 样品溶液的准备
  选择市面上常见的玛咖干制品, 粉碎后过50目筛, 备用。利用电子天平精密称取粉末1.5g, 置于50m L的圆底烧瓶中, 加入50.0m L石油醚 (保证玛咖粉末能够完全浸没于石油醚中) , 将圆底烧瓶置于合适大小的电热套中, 安装回流管回流提取约6h, 将提取液和玛咖渣一同倒入50m L离心管中, 5000rpm离心10min。将上清液进行旋蒸, 使石油醚与玛咖酰胺进行分离, 选用乙腈溶液将提取物溶解定容至5m L, 并利用0.22μm一次性过滤器进行过滤, 得到5种玛咖酰胺的样品提取物。
 
  2.1 玛咖酰胺提取物的紫外色谱图
  玛咖酰胺提取物在210nm色谱条件下, 得到图1, 色谱条件与上文中列出的条件相同。
  玛咖酰胺提取物的色谱出峰顺序及时间为间甲氧基-苄基-亚麻酰胺15.003min, 苄基-亚麻酰胺15.659min, 间甲氧基-苄基-亚油酰胺19.846min, 苄基-亚油酰胺20.828min, 苄基-十六烷酰胺28.022min。